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微生物培養基的滅菌方法歸納


滅菌的方法,通常可以分為加熱滅菌(包括直接灼燒滅菌、干熱滅菌、加壓蒸汽滅菌、間歇滅菌和煮沸消毒)、過濾去菌、射線滅菌和消毒、化學藥劑滅菌和消毒四大類。下面具體講解微生物培養基的滅菌步驟http://www.kkpkp.cn/
 
l. 干熱滅菌法(即熱空氣滅菌法)
干熱滅菌一般是利用電熱烘箱作為干熱滅菌器。前面所包裝好的玻璃器皿,如帶棉塞的三角瓶,試管、包裝好的吸管、培養皿等,放入電熱烘箱中。
打開烘箱頂部的通氣孔,接上電源加熱,使箱內空氣的溫度達到160℃~170℃,關閉通氣孔使箱內的溫度保持在160℃左右并維持1.5-2h。時間一到,切斷電源。待溫度下降60℃~70℃以下,方可打開箱門取滅菌物品,否則驟冷后易使箱內玻璃儀器破損。
 
2. 加壓蒸氣滅菌法
利用高壓滅菌器,使水的沸點在密閉的滅菌器內隨壓力升高而增高,來提高蒸汽的溫度和滅菌的效率。
在同一溫度下濕熱的殺菌效率比干熱大,因為微生物細胞蛋白質在濕熱情況下,易干凝固。同時濕熱的穿透力強,當水蒸汽與被滅菌的物品相接觸后,便放出汽化潛熱,逐步提高被滅菌物品的溫度,直至與水蒸汽的溫度相等,達到平衡為止,從而提高滅菌效率。
 
3. 間歇滅菌法http://www.kkpkp.cn/
常采用阿諾(Arnold)氏滅菌器和柯赫(Koch)氏滅菌器或蒸籠滅菌,常壓條件下蒸汽溫度不超過100℃。在沒有高壓滅菌器設備的情況下或不宜加壓滅菌的物品,可采用此法滅菌。
方法是:待滅菌物品放在滅菌器或蒸籠里,每d蒸煮1次,每次煮沸lh,連續3d重復進行。在每兩次蒸煮之間,將物品(指培養基)放在37C恒溫條件下培養過夜,這樣可以使每次蒸煮后未殺死的殘留芽孢萌發成營養體,以便下1次蒸煮時殺滅。
 
4. 過濾除菌法
一些不能加熱滅菌的液體物質(如維生素、血清),可以用過濾除菌法,一般用細菌過濾器進行除菌。
細菌過濾器中的過濾板常用陶瓷、硅藻土或石棉等做成,過濾板孔眼很小,細菌不能通過。因此,過濾后的液體就除去了細菌。在進行過濾除菌前,整個細菌過濾器和接受液體的器皿,必須要包裝妥當并進行加壓蒸汽滅菌后方可使用。
 
5. 紫外線滅菌http://www.kkpkp.cn/
波長260~280nm之間的紫外線有很強的殺菌能力,一般紫外燈管能產生253.7nm的紫外光,殺死力強而穩定,但穿透力弱一般只適宜物體表面、空氣滅菌。例如接種室、培養室、手術室、藥廠包裝室等空氣滅菌。一般30w燈管、9m3空間,距地面2m每次打開紫外線照射0.5h,就使室內空氣滅菌。若照射紫外線時,先噴灑石碳酸等化學消毒劑,可增強滅菌效果。
在進行微生物接種和分離等操作時,常須用紫外線來殺滅接種室(箱)空氣、臺面等處的微生物。
紫外線雖有較強的殺菌力,但穿透力較弱,即使一薄層玻璃或水層就能將大部分紫外線濾除,因此只適用于空氣及表面殺菌。
紫外線對眼粘膜及視神經有強烈的損傷作用,對皮膚有刺激作用,所以不能直接在紫外線燈開啟下工作和用眼睛直視開啟的紫外燈。
 
6. 化學藥劑消毒滅菌
微生物實驗室中常用的化學殺菌劑有升汞、甲醛、高錳酸鉀、酒精、碘酒、龍膽紫、石炭酸、漂白粉、新潔爾滅、煤酚皂溶液,它們有的是殺菌劑,有的是抑菌劑。

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